支原體PCR檢測實驗操作樣品的收集
　　
　　支原體PCR檢測實驗操作
　　
　　PCR反應(yīng)的前期操作應(yīng)在無菌環(huán)境中進行。
　　
　　（1）樣品的收集：待測細(xì)胞用抗培養(yǎng)基培養(yǎng)7d，用無菌容器取上清液500ul，4℃保存待測。
　　
　?。?）模板的制作：在無菌的條件下，取細(xì)胞培養(yǎng)上清100ul于一無菌的0.5ml塑料離心管內(nèi)，蓋好蓋子，95℃水浴加熱5min。
　　
　?。?）打開蓋子，向管內(nèi)加StrataCleanresin10ul，蓋好蓋子，旋渦混懸器混合，離心5—10s，吸取上清至一新的塑料離心管中，模板制作完畢，4℃保存。
　　
　?。?）PCR反應(yīng)：反應(yīng)體系zui適條件為：10mmol/lTris-HCL（pH8.38）；50mmol/lHCL；1.5-2.5mmol/lMgCL2；200umol/ldNTP；2UDapDNA聚合酶?？偡磻?yīng)體系為50ul，反應(yīng)用去離子水均需用12000uw/cm2紫外燈照射。
　　
　　VenorGeM支原體污染檢測試劑盒（一步法）支原體PCR檢測試劑盒組成：
　　
　　Mix干粉（引物、dNTP、熱啟動taq酶，內(nèi)控對照），重懸緩沖液，陽性對照DNA，Tris/EDTA緩沖液。
　　
　　特點：
　　
　　廣譜（包含常規(guī)26種支原體）
　　
　　靈敏度高
　　
　　特異性好
　　
　　操作簡單
　　
　　便捷（整個操作不到3小時）