淺述顯色培養(yǎng)基具體的操作步驟
更新時(shí)間：2022-03-10 | 點(diǎn)擊率：735
顯色培養(yǎng)基是用于微生物選擇性生長(zhǎng)和鑒定的微生物培養(yǎng)基。培養(yǎng)基是利用某個(gè)屬的細(xì)胞質(zhì)中所含的特定酶。酶中只含有這種細(xì)菌的越多，酶對(duì)鑒定的準(zhǔn)確性和特異性就越高。將酶的特定顯色底物添加到顯色培養(yǎng)基中。當(dāng)這種細(xì)菌大量生長(zhǎng)時(shí)，生色底物滲入細(xì)菌內(nèi)部，被酶裂解而產(chǎn)生顏色，從而使菌落也有顏色。二是在培養(yǎng)基中加入抗生素或膽鹽混合物，以抑制其他無(wú)關(guān)細(xì)菌的生長(zhǎng)，即增加選擇性，或調(diào)整培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)。一些無(wú)關(guān)的細(xì)菌由于缺乏養(yǎng)分而無(wú)法生長(zhǎng)，而目標(biāo)細(xì)菌的養(yǎng)分可以在培養(yǎng)基中得到滿(mǎn)足，因此可以生長(zhǎng)。 顯色培養(yǎng)基能夠允許好幾種菌生長(zhǎng)，同時(shí)進(jìn)行鑒別，使這些菌產(chǎn)生不同的顏色，這是利用這些菌分別攜帶有不同的代謝酶，同時(shí)在培養(yǎng)基中加有顯色混合物，即這幾種酶的顯色底物，而且當(dāng)它們裂解時(shí)，顏色各不相同，這樣就能夠把它們區(qū)分開(kāi)來(lái)。
顯色培養(yǎng)基操作步驟：
1、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；
2、取25克樣品液加入225mlmEC肉湯或mTSB肉湯中，36℃增菌培養(yǎng)18-24小時(shí)；
3、用3mm接種環(huán)取1環(huán)增菌液，劃線接種到O157菌顯色培養(yǎng)基上，做2個(gè)平板；
4、36℃培養(yǎng)18-24h，O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色，菌落周?chē)鷽](méi)有藍(lán)色暈圈；大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色，菌落周?chē)兴{(lán)色暈圈；其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無(wú)色；
5、對(duì)典型菌落可做O157:H7菌血清學(xué)試驗(yàn)和全套生化試驗(yàn)。必須在36℃培養(yǎng)24小時(shí)內(nèi)判讀結(jié)果，以免菌落顏色發(fā)生變化。
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