實時熒光定量

核酸擴增檢測系統(tǒng)

qPCR主要是利用插入性染料或熒光探針，人們可以通過監(jiān)控PCR過程中的熒光強度比較多個樣品的DNA水平。

qPCR本質(zhì)就是測定樣品中某個模板的起始量ct值。但在實際操作過程中，由于之前DNA提等步驟，各個步驟存在不同的效率，在實驗過程中也存在加樣誤差、各孔溫度差等影響，每個樣本的Ct值并無法真實反映每個樣品中初始模版的絕對量，這就使得我們無法對不同處理的樣本進行分析評價。因此，我們需要一個參考標準對每一個樣本進行校正，排除其他無關因素帶來的的影響。

內(nèi)控(內(nèi)參，Internal Control)，也就是內(nèi)部參照測量，也叫內(nèi)部控制。使用內(nèi)參的目的是便于在分析過程中，將不同樣品的起始量做均一化處理。內(nèi)參通常選擇在不同組織中有穩(wěn)定表達量或不受實驗處理影響的基因，在每個樣品中的表達量不發(fā)生變化，比如管家基因（house-keeping gene）。以小鼠為例，常用的內(nèi)參有β-actin、18S rRNA、α-tublin和GAPDH等，有時也可以用基因組DNA做內(nèi)參。

但需要注意的是，現(xiàn)在也有觀點認為，這些基因在不同組織中豐度也不同，例如GAPDH，在線粒體含量高的組織中豐度高。有時候，不同的研究實驗需要選擇不同的內(nèi)參。一些文章在發(fā)表時，審稿人也會要求使用兩個內(nèi)參加以證實。

MB Venor®Gem qEP，用經(jīng)典的qPCR方法檢測樣品中是否含有支原體，其中也會用到內(nèi)參（內(nèi)控），可以在對支原體其作用也是對樣品做均一化處理，保證實驗結果的穩(wěn)定。

MB Venor®Gem qEP

產(chǎn)品特點：

1.內(nèi)控對照為獨立包裝，遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

2.高特異性，一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種（包括歐洲藥典規(guī)定的9種支原體）。與細菌和真核DNA無交叉反應。

3.高靈敏度，檢測限可達到≤10CFU/ml。

4.相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA，便于特異性驗證。

5.有相應配套的支原體定量標準品，便于最后定量檢測。