細(xì)胞支原體（Mycoplasma）是一類缺乏細(xì)胞壁的微生物，體積微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，常寄生于哺乳動(dòng)物細(xì)胞中。由于其能在細(xì)胞培養(yǎng)中長(zhǎng)期存在且不易被肉眼或普通顯微鏡發(fā)現(xiàn)，支原體污染成為細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中最隱蔽、最常見的問題之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球約15%~35%的細(xì)胞培養(yǎng)存在支原體污染，這不僅會(huì)影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性，還可能導(dǎo)致科研資源浪費(fèi)。因此，細(xì)胞支原體檢測(cè)試劑盒應(yīng)運(yùn)而生，成為實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)胞質(zhì)量控制、確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要工具。
細(xì)胞支原體檢測(cè)試劑盒的組成：
1.樣品預(yù)處理試劑
包括裂解液或提取緩沖液，用于從細(xì)胞培養(yǎng)基或細(xì)胞中提取支原體DNA或RNA，為后續(xù)檢測(cè)提供純凈模板。
2.特異性引物和探針
對(duì)PCR法和熒光定量法來說，引物和探針是關(guān)鍵組成部分，能夠特異性識(shí)別支原體的16SrRNA或其他保守基因序列，從而保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
3.酶及緩沖液
包括DNA聚合酶、緩沖液和必要的反應(yīng)組分，保證擴(kuò)增反應(yīng)順利進(jìn)行。
4.陽性對(duì)照和陰性對(duì)照
為驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果提供標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照。陽性對(duì)照含有已知濃度的支原體DNA或RNA，陰性對(duì)照不含支原體，能夠判斷實(shí)驗(yàn)過程中是否出現(xiàn)污染或操作失誤。
5.檢測(cè)工具與說明書
如凝膠電泳試劑、顯色底物、熒光讀數(shù)板等，以及詳細(xì)操作說明和數(shù)據(jù)分析方法，確保實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性和可靠性。
應(yīng)用：
1.科研實(shí)驗(yàn)室
在干細(xì)胞研究、腫瘤細(xì)胞研究、基因功能研究等領(lǐng)域，支原體污染會(huì)嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。定期使用檢測(cè)試劑盒能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)污染并采取處理措施。
2.藥物研發(fā)與生產(chǎn)
藥物研發(fā)實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞支原體污染可能導(dǎo)致藥物活性評(píng)估偏差，影響藥效學(xué)研究和毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)。藥企細(xì)胞庫(kù)也常使用檢測(cè)試劑盒進(jìn)行質(zhì)量控制。
3.生物制品生產(chǎn)
在疫苗、重組蛋白等生物制品生產(chǎn)過程中，支原體污染不僅影響產(chǎn)量，還可能帶來安全風(fēng)險(xiǎn)，因此檢測(cè)試劑盒是質(zhì)量管理體系的重要組成部分。
4.高校與教學(xué)實(shí)驗(yàn)室
對(duì)于高校生物實(shí)驗(yàn)室，檢測(cè)試劑盒可用于教學(xué)演示和細(xì)胞培養(yǎng)管理，培養(yǎng)學(xué)生規(guī)范操作和質(zhì)量控制意識(shí)。
使用細(xì)胞支原體檢測(cè)試劑盒的注意事項(xiàng)：
1.避免交叉污染
實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)嚴(yán)格區(qū)分工作區(qū)，使用一次性耗材，避免試劑或樣品之間的交叉污染。
2.嚴(yán)格按照操作規(guī)程
包括樣品提取、反應(yīng)配制、反應(yīng)條件控制等，任何步驟偏差都可能導(dǎo)致假陽性或假陰性結(jié)果。
3.定期檢測(cè)
對(duì)長(zhǎng)期培養(yǎng)的細(xì)胞，應(yīng)每2~4周進(jìn)行一次檢測(cè)，確保細(xì)胞庫(kù)的清潔和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。
4.保存試劑條件
檢測(cè)試劑盒中的酶和探針通常對(duì)溫度敏感，應(yīng)嚴(yán)格按照說明書要求儲(chǔ)存，避免反復(fù)凍融。
400-166-8600
當(dāng)前位置：